技术领域
[0001] 本发明涉及艾瑞昔布杂质及质量检测方法，属于药物领域。
相关背景技术
[0002] 艾瑞昔布API是我国原研的1.1类选择性环加氧酶‑2抑制剂，于2011年6月获得国家食品药品监督管理总局的上市批准。艾瑞昔布的I至W期试验研究均证明它是治疗膝骨关节炎安全有效的药物。与传统非体抗炎药相比，艾瑞昔布对消化系统和心血管系统等的不良反应明显减少，因此，艾瑞昔布同时也被广泛应用于中轴性脊柱炎、痛风、围手术期镇痛等多个疾病领域。
[0003] 艾瑞昔布Ⅱ～Ⅳ期临床试验显示，其药物不良反应主要是胃肠道反应，艾瑞昔布属于非甾体抗炎药，艾瑞昔布具有一定程度的消化道风险，对胃肠道、心血管和肾功能的影响，艾瑞昔布对肾功能不全受试者的平行、开放、单周期配对研究显示，餐后口服艾瑞昔布片100mg，于不同时间点采集血样,受试者两个活性代谢产物M1和M2的血浆暴露量增加、消除减缓、半衰期延长,建议降低艾瑞昔布在重度慢性肾病患者的临床给药剂量，并在给药后定期检测肾功能。艾瑞昔布在I～W期临床试验中除了表现出以上主要药物不良反应外，还出现了其他系统及实验室检查异常，如血液系统、肝功能和凝血异常、中枢和周围神经系统症状、皮疹和皮肤瘙痒、上呼吸道感染、流感样症状、乳房痛和球结膜充血。
[0004] 导致药物的副作用的原因之一是药物的纯度，目前艾瑞昔布国家标准(YBH02242015)中有对其中杂质C、光降解产物1的检测。李飞高，等，高效液相色谱原串联质谱法测定艾瑞昔布片中艾瑞昔布的含量，河北医科大学学报，2014年3月第35卷第3期，建立测定艾瑞昔布片剂中艾瑞昔布的高效液相色谱‑串联质谱含量测定方法，其中未提及艾瑞昔布中杂质的检测。刘丹丹，等，GC‑MS法测定艾瑞昔布中溴乙酸酯类基因毒性杂质，天津药学，2023年第35卷第5期，公开了艾瑞昔布中溴乙酸酯类基因毒性杂质溴乙酸甲酯、溴乙酸乙酯、溴乙酸丙酯、溴乙酸异丙酯的测定。
[0005] 目前对于艾瑞昔布杂质的研究仍较少，现有的检测标准主要针对已知的杂质，可能无法准确检测和鉴定新出现或低浓度的杂质。更重要的是，新杂质的出现可能会改变API的整体杂质组合，从而可能影响药物的安全性和有效性。这些局限性构成了本发明解决的主要技术问题，即准确检测、鉴定和纯化艾瑞昔布API中的新杂质，以及全面评估API的整体杂质组合。现有的标准不能满足艾瑞昔布质量控制，此外，临床实践中还发现有因放置时间过长，影响疗效。
具体实施方式
[0039] 实施例1本发明艾瑞昔布杂质的制备
[0040] 样品准备：取适量的API原料药样品进行样品准备。
[0041] 初步检测：使用高效液相色谱(HPLC)进行初步杂质检测。
[0042] 新杂质检出：如果检测到未知的杂质峰，进入下一步分离。
[0043] 新杂质分离：使用某种色谱或其他适当的方法对新杂质进行分离。
[0044] 杂质鉴定与结构确定：使用核磁共振(NMR)、质谱(MS)和红外光谱(IR)等手段进行新杂质的结构鉴定和确定。
[0045] 新杂质制备与产生过程了解：通过实验室规模的合成或生产过程模拟，了解新杂质的产生机理。
[0046] 纯化工艺优化：根据新杂质的产生机理，优化制定纯化工艺。
[0047] 量化分析：对新杂质进行量化分析，以确定其在API中的浓度。
[0048] 整体杂质组合评估：结合已知杂质和新杂质的数据，进行API整体杂质组合的评估。
[0049] 质量和安全性评估：根据整体杂质组合的评估结果，进行药物的质量和安全性评估
[0050] 制备流程如下：
[0051]
[0052] 杂质Ⅰ：将主要原料艾瑞昔布用乙酸乙酯溶解，加入5％活性炭，60℃空气条件下加热搅拌，通过TLC监测原料艾瑞昔布反应完全。利用硅藻土过滤掉活性炭，滤液浓缩后通过柱层析(DCM/MeOH＝20/1)纯化。
[0053] 杂质Ⅱ：将空气条件下久置变质的原料艾瑞昔布通过柱层析(PE/EA＝3/1)纯化即可得到一种新型艾瑞昔布酮类杂质。
[0054] 杂质Ⅰ和杂质Ⅱ的鉴定结果见图1‑图8。
[0055] 实施例2本发明艾瑞昔布杂质的检测方法
[0056] a、待检测样品前处理：取少量待测样品用HPLC乙腈溶解，滤膜过滤除掉可能存在的固体悬浮物。
[0057] b、标准品处理：包括艾瑞昔布标准品、杂质Ⅰ、杂质Ⅱ的处理方法，取少量标准品用HPLC乙腈溶解，滤膜过滤除掉可能存在的固体悬浮物。
[0058] c、HPLC色谱检测，色谱条件为：
[0059] HPLC：流动相为乙腈：水＝53:47
[0060] 柱温：35℃
[0061] 流速：1mL/min
[0062] 检测波长228nm
[0063] 色谱柱：Agilent ZORBAX SB‑C18 5um 4.6×250mm
[0064] 杂质Ⅰ：[M+H]+386.2,杂质Ⅱ：[M+H]+384.1。
[0065] 本发明检测方法重现性好，在同一条件下，能将杂质Ⅰ、杂质Ⅱ分离，如图9所示。
[0066] 图谱结果表明杂质Ⅰ出峰时间在5.04分钟左右，杂质Ⅱ出峰时间在18.80分钟左右，艾瑞昔布出峰在6.74分钟左右，相对保留时间在±10％范围内波动。杂质Ⅰ、杂质Ⅱ和艾瑞昔布保留时间有明显差异，可以分别将两种杂质与原料艾瑞昔布分开。
